看完本篇你就知道什么是蛋白層析柱了

　　蛋白質(zhì)是生命活動(dòng)的物質(zhì)基礎(chǔ)，也是生物體內(nèi)的功能性大分子。隨著分子生物學(xué)、結(jié)構(gòu)生物學(xué)、生物制藥行業(yè)等研究的不斷深入，蛋白質(zhì)純化成為近年來(lái)越來(lái)越熱的研究話題。

　　蛋白的純化大致分為粗分離階段和精細(xì)純化階段兩個(gè)階段。粗分離階段主要將目的蛋白和其他細(xì)胞成分如RNA、DNA 等分開(kāi)，常用的方法為硫酸銨沉淀法。

　　精細(xì)純化階段的目的是把目的蛋白與其他大小及理化性質(zhì)接近的蛋白區(qū)分開(kāi)來(lái)，常用的方法有：凝膠過(guò)濾層析、離子交換層析、疏水層析、親和層析等。其中，凝膠過(guò)濾層析是常見(jiàn)的純化手段之一。

　　蛋白層析柱是一種根據(jù)分子大小從混合物中分離蛋白質(zhì)的方法。不同蛋白的形狀及分子大小存在差異，在混合物通過(guò)含有填充顆粒的凝膠過(guò)濾層析柱時(shí)，由于各種蛋白的分子大小不同，擴(kuò)散進(jìn)入特定大小孔徑顆粒內(nèi)的能力也各異，大的蛋白分子會(huì)被先洗脫出來(lái)，分子越小，越晚洗脫，從而達(dá)到分離蛋白的目的。

　　凝蛋白層析柱中的填料大多是交聯(lián)的聚糖(如葡聚糖或瓊脂糖)類(lèi)物質(zhì)，在不同的流動(dòng)相中溶脹變化差異比較大，因此，蛋白層析柱管也不同一般的玻璃柱，柱床長(zhǎng)度通?？烧{(diào)節(jié)，分為一端可調(diào)軸向壓縮和兩端可調(diào)軸向壓縮柱。匯通色譜現(xiàn)推出BSXK夾套式蛋白層析柱和Better Glass系列蛋白層析柱，廣泛應(yīng)用于蛋白、多肽、抗體、酶、病毒、重組蛋白等生物分子純化。

　　下面讓我們來(lái)了解一下蛋白層析柱的特點(diǎn)有哪些。

　　1、柱塞設(shè)計(jì)，柱填裝體積可根據(jù)需要自行調(diào)整，一根柱管就可代替多根固定柱管;

　　2、人性化設(shè)計(jì)，操作簡(jiǎn)單，清洗方便，易于拆卸組裝;

　　3、流路多為惰性材料，溶劑耐受性能好;

　　4、篩板孔徑可自定義，適用于各種規(guī)格填料;

　　5、無(wú)截留死體積，保證內(nèi)部填料分布均勻，重現(xiàn)性好;

　　6、關(guān)鍵部分采用PEEK材質(zhì)，生物兼容性好;

　　7、夾套可維持一定的熱穩(wěn)定操作溫度，針對(duì)敏感樣品純化具有冷卻外殼;

　　8、BSXK空柱管材料為高硼硅玻璃，可以目測(cè)到柱床狀態(tài)，及時(shí)進(jìn)行色譜柱重新填裝，提高實(shí)驗(yàn)效率;

　　9、玻璃材質(zhì)使分離過(guò)程更加直觀;

　　10、種類(lèi)豐富，可根據(jù)要求選定一端可調(diào)軸向壓縮和兩端可調(diào)軸向壓縮柱;

　　應(yīng)用范圍

　　●蛋白純化：用于從復(fù)雜混合物中純化出目標(biāo)蛋白質(zhì)，廣泛應(yīng)用于生物制藥和生物化學(xué)研究。

　　●核酸純化：部分層析技術(shù)也可用于純化核酸等其他生物大分子。

　　操作步驟

　　●裝柱：選擇適合的層析介質(zhì)裝填入柱，確保介質(zhì)均勻無(wú)氣泡。

　　●平衡：用緩沖液預(yù)先平衡層析柱，準(zhǔn)備樣品上樣。

　　●上樣：將準(zhǔn)備好的蛋白質(zhì)樣品緩慢加入柱頂，避免擾動(dòng)床層。

　　●洗脫：根據(jù)層析類(lèi)型，采用適當(dāng)?shù)南疵撘簩⒔Y(jié)合的蛋白質(zhì)按順序從柱中洗脫出來(lái)。

　　●收集：從柱出口收集洗脫液，并進(jìn)行檢測(cè)和分析，以獲得純化后的蛋白質(zhì)