乳制品牛乳中乳糖含量測定分析

1. 介紹

乳糖是兒童生長(cháng)發(fā)育的主要營(yíng)養物質(zhì)之一，對青少年智力發(fā)育十分重要，特別是新生嬰兒*的，在自然界中只有哺乳類(lèi)動(dòng)物的奶中含有乳糖，各類(lèi)植物性食物中是不含乳糖的。一分子乳糖消化可得一分子葡萄糖和一分子半乳糖。半乳糖能促進(jìn)腦苷脂類(lèi)和黏多糖類(lèi)的生成，因而對幼兒智力發(fā)育非常重要。乳制品企業(yè)通常通過(guò)測定牛乳中半乳糖的含量來(lái)計算牛乳中乳糖的含量。

2. 實(shí)驗

設備：

ELSD3300蒸發(fā)光散射檢測器

Agilent 1260 HPLC，C.01.07

試劑及耗材：

流動(dòng)相A：超純水

流動(dòng)相B：色譜純乙腈

色譜柱：Beksich糖柱，4.6*250mm,5um

（貨號：Bek445101）

柱溫箱溫度：

30C

樣品：

牛乳樣品提取物

樣品預處理: 

樣品經(jīng)蛋白沉淀后，0.45um濾膜過(guò)濾后取上清液待上樣

進(jìn)樣體積:

20ul

按78%乙腈：22%水等梯度比例進(jìn)行檢測，運行時(shí)間為20min

流動(dòng)相流速：

0.9ml/min

樣品檢測：

樣品配置好后置于自動(dòng)進(jìn)樣器中，使用編輯好的方法進(jìn)行自動(dòng)進(jìn)樣分析

3. 結果

 ELSD3300蒸發(fā)光散射檢測器測定牛乳中乳糖含量

結果見(jiàn)表1。

表 1：乳糖定量檢測，*個(gè)峰為半乳糖

表2：半乳糖和葡萄糖分離度及拖尾因子情況

表 3：半乳糖定量曲線(xiàn)

 R=0.99903

本次實(shí)驗的難點(diǎn)是樣品沒(méi)有紫外吸收，樣品水溶性強，需用乙腈稀釋?zhuān)?/span>半乳糖和葡萄糖不易達到基線(xiàn)分離。且ELSD3300運行參數如氣體流速和檢測溫度以及增益值必須優(yōu)化。

4. 結論

本方法使用ELSD3300測定了牛乳中半乳糖的含量，半乳糖和葡萄糖實(shí)現了基線(xiàn)分離，ELSD3300有平衡時(shí)間短，基線(xiàn)噪音小，重現性高和線(xiàn)性好等特點(diǎn)。