有機酸分析柱詳細使用說明

 　　作為有機酸分析柱的廠家，我們擁有豐富的產(chǎn)品經(jīng)驗，下面給大家介紹下有機酸分析柱的詳細使用說明，希望可以給客戶一些借鑒參考。

　　有機酸分析柱填充的是聚合物材料，需要特殊的維護。向柱內(nèi)導(dǎo)入以下介紹了的以外的有機溶劑會導(dǎo)致聚合物材料膨脹和過度增壓。因此，你應(yīng)當(dāng)在安裝柱子以前，先用異丙醇，然后用0.1N的硫酸十分*地沖洗管路以*去除有機溶劑。

　　在使用這個有機酸分析柱之前，我們建議客戶應(yīng)熟讀有機酸分析柱的使用說明。

　　有機酸分析柱填充有氫形式的陽離子排斥樹脂，特別開發(fā)用于在低牙條件下分離包括酒、果汁、奶制品、生物樣品、工業(yè)原料和環(huán)境樣品中的有機酸。

　　一、洗脫

　　推薦使用濃度范圍在0.002到0.05N的稀硫酸溶液。大多數(shù)的分析使用0.01N的硫酸(pH=±2.3)都可以獲得成功。其他的強酸例如磷酸和高氯酸也可以使用，但是鹵酸例如鹽酸不推薦使用，因為它們會腐蝕不銹鋼。

　　當(dāng)有強酸用于柱子的洗脫液的時候，柱子就進行了自身再生。所以，特別的再生步驟是不需要的。但是這樣并不能直接對洗提強度和大多數(shù)有機酸的保留性質(zhì)進行校正，較強的洗提強度通常只減少zui后餾出的化合物的保留時間。

　　在使用以前，所有的洗脫液都要用0.45μm濾膜過濾和脫氣。對于這個有機酸分析柱，使用有機相修正，例如乙腈(zui大20%)，可以縮短保留時間。這樣做，總是會造成背壓的升高。所以，較高的操作溫度和較低的洗提流速通?？捎糜诜乐巩a(chǎn)生過高壓力。

　　注意，一旦對柱子使用了有機相修正，柱子就會保留使用了有機相修正的洗脫液的色譜特性，即使洗脫液已經(jīng)恢復(fù)到原始的100%的水相，柱子的性質(zhì)也不會回到當(dāng)初發(fā)貨時的狀態(tài)了。

　　因此，如果你的應(yīng)用中包括有芳香酸或不飽和酸，它們會出現(xiàn)較長的保留時間，我們推薦使用芳香酸柱(Cat.no.28352)，它是專門設(shè)計用于此類化合物的。

　　二、流量和壓力

　　推薦用于有機酸分析柱的流量是0.3-0.8ml/min。任何情況下洗脫流量都不能超過0.8 ml/min，記住柱子壓力產(chǎn)生的原因有洗脫流速，柱溫，洗脫液的黏度等等。

　　要限制洗提流速，使泵壓力不超過2200PSI。在45°C，0.6ml/min流速時，預(yù)期的壓力應(yīng)當(dāng)在600-1500 PSI之間。如果在此條件下，柱壓超過了1200 PSI，通常指示有污染物沉積在填充材料上，必須采取改正的措施。

　　三、樣品準(zhǔn)備

　　保持柱子長壽的關(guān)鍵是進樣前適當(dāng)?shù)牡臉悠诽幚?。你必須防止將脂肪，油脂，蛋白質(zhì)物質(zhì)和重金屬離子導(dǎo)入色譜柱，不管是流動相還是樣品。特別地，要禁止導(dǎo)入顆粒雜質(zhì)。這些zui終都會造成操作壓力的增高而且非常困難或者不可能去除。

　　生物樣品在注射以前必須除去蛋白質(zhì)。較好的除蛋白試劑是磺基水楊酸。

　　通常使用的樣品量在10-50微升的范圍內(nèi)，但是進樣高達100微升應(yīng)當(dāng)沒有問題。進樣500微升或者更多可能會導(dǎo)致峰變寬或者融合。

　　四、柱前過濾器

　　柱前過濾器含有0.5-2.0um的多孔不銹鋼燒結(jié)物，安裝在樣品注射器和柱子之間用于從洗脫液中去除顆粒物。這樣可以防止分析柱產(chǎn)生壓力增高的問題，延長柱子的壽命。當(dāng)有保護柱的時候，柱前過濾器就可以不用了。

　　五、保護柱

　　保護柱應(yīng)當(dāng)用在這個柱上，因為樣品和洗脫液污染可能會造成柱壓力的增高。樣品中諸如鹽和蛋白質(zhì)類的污染物可能會使柱效降低，在注射進柱子以前應(yīng)當(dāng)去除。

　　六、溫度

　　有機酸分析柱可以在20-90°C使用，提高柱溫會改善柱效。然而，柱溫也會樣品的保留，所以建議使用柱溫箱以保證得到可以重復(fù)的結(jié)果。

　　由于某些分離對溫度非常敏感，所以有必要仔細地操控溫度以優(yōu)化分離效果。如果在室溫使用這個柱子，洗脫流速必須降低保持泵壓不高于2200PSI。

　　七、貯存

　　有機酸分析柱提供給你的時候使用0.01N的硫酸作為平衡。這也是建議的用于貯存的洗脫液。柱子在保存的時候，一定要使用提供的螺絲和墊圈將端口密封。色譜柱必須以這種方式使用和保存，在任何時候都要保證不使柱床干涸。不正確的貯存(沒有密封)或不正確的使用，會導(dǎo)致填充材料部分地干涸，會發(fā)生高的柱壓。在這種情形下，可以倒轉(zhuǎn)柱子，要以0.1ml/min的流速在90°C向柱子泵入0.01N的硫酸。

　　以上是關(guān)于有機酸分析柱的詳細使用說明，更多內(nèi)容咨詢上海宸喬生物科技有限公司。